谈谈液相色谱仪 制备液相和分析液相有什么区别
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和制备液相对应的,是分析液相。它们的蕞大差别,不在于外形,而在于目的。
分析液相的目的当然是为了分析样品,有什么成分,含量多少,也叫做定性定量。要做好分析液相,最关注的是分离度和灵敏度,要分得开,测得到,测得准。
而制备液相是利用色谱柱的分离能力,来去除杂质,得到高纯样品。
为什么强调纯度呢?在实验室里,红外、紫外、核磁这些仪器,都要求样品达到足够的纯度,才能得到准确的结果。除了实验室,药品的生产也需要纯化,特别是生物制品和药剂。
很多生物制品如果是直接吃下去,跟吃个鸡蛋也没什么不同,直接注射才能保留活性成份。
而注射治疗,药物会直接进入血液,所以纯度非常重要。在实验室里,用于制备的液相,配置和普通的分析液相差不多。有泵,有进样器,有柱子,有检测器。
为了收集分离出来的化合物,制备液相通常还配一个馏分收集器。馏分收集器就像液相色谱的收纳盒,把每次分析的同类物质收纳到一起。馏分收集器可以直接串联在检测器后面。也可以连接一个三通,和检测器并联,都接在色谱柱的后面。有些实验室里需要收集的量很大,一个馏分收集器装不完,还可以并联好几个。
根据检测器的信号显示,当化合物出峰的时候,仪器会自动收集。一般按照时间编程,也可以根据检测器的信号强度自动触发。一个个化合物通过馏分收集器收集到小瓶或者试管里,也可以通过管路连接到更大的瓶子。
制备液相有很多种分类方法,比如按压力分类,或者按产量分类,彼此之间有交叉,没有明确的标准。不同类型的制备液相有着不同的特点。比如这根用在生产上的制备液相柱,模样和实验室里有些不同。仅仅内径就有1.6m,色谱柱的重量有36吨重,每天消耗的流动相能放满半个小游泳池。除了特别大的,还有特别小的。比如微克级制备,也常被称为微量制备,它的有趣之处在于微量馏分收集器,可以直接使用MALDI点样板MALDI实现离子化的关键是将样品和基质混合,再点在靶板或叫点样板上,用激光打击基质,就可以实现离子化。
而现在的微量馏分收集器,可以将Nano液相分离之后的化合物直接点在MALDI的点样板上,并且自动的添加基质。这样无缝连接的合作,即发挥了液相的分离纯化功能,又简化了MALDI的样品制备,在生命科学和药物分析领域都有着非常广阔的应用前景。
不论是制备液相还是相关的联用技术,都还在不断的发展和进步,不断的更新和突破,所以给出的建议常常处于变化之中。
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