谱析分享 自动顶空进样-气相色谱法开发出新应用 厌氧菌活性检测
我们每天都生活在被细菌包围的世界里。不仅日常环境中时时刻刻都接触到细菌,就连人体的皮肤表面和身体内部特别是消化系统中也寄居着数以万亿计的细菌。其中多数是厌氧菌。正常情况下,这些细菌对人体无害,甚至对人体生长发育和身体健康有着不可缺少的作用。但是一旦皮肤、粘膜屏障功能减退或者菌群移位引起菌群失衡,厌氧菌就会引发感染,对健康造成危害。
厌氧菌几乎可以感染所有的组织器官,导致口腔感染、阑尾炎、中耳炎、骨髓炎还有败血症、破伤风等多种疾病,有些疾病还会危及生命。针对厌氧菌感染的主要治疗方式是广谱抗菌疗法,即利用广谱抗生素,如青霉素、阿莫西林、氧氟沙星等进行治疗。
随着厌氧菌的耐药性越来越强,基于经验的传统广谱抗菌疗法的适用性已经开始变得越来越低,经常出现临床治疗失败的情况。为了解决这一问题就需要建立基于试验和检测的抗厌氧菌药物药效评价方法,准确判断药物的抗厌氧活性。然而厌氧菌的培育需要低氧或者无氧的环境,而且厌氧菌生长缓慢,因此候选药物的抗厌氧试验往往成本很高而且效果不佳。
近日,武汉植物园的研究团队开发了一种利用顶空-气相色谱法(HS-GC-TCD)测定候选药物抗厌氧活性的新方法。这种方法利用厌氧菌代谢产生酸的特点,将培养基中的代谢酸度作为厌氧菌活性的测试指标。代谢酸与碳酸氢钠反应,完全转化为二氧化碳,然后用HS-GC-TCD检测二氧化碳的含量。该方法对细胞活性反应更灵敏,可以极大地增加抗厌氧活性检测的精度(相对标准偏差低于5%),而且可以减少交叉污染,适合于抗厌氧活性的多种药物的常规筛选。
顶空-气相色谱法又称液上气相色谱分析法,将顶空进样器与气相色谱仪相连。其中顶空进样器可专一性收集样品中的易挥发性成分或者萃取吸附气体样品然后直接导入气相色谱仪进行分离和检测,简单实用。顶空-气相色谱法目前已经在环境检测、食品、药品中有机残留溶剂检测等方面有广泛的应用。研究团队开发出的新方法不仅为抗厌氧药物提供了有效的药效评价工具,也为顶空-气相色谱法开拓了新的应用领域。
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